細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)樣本和生物素化的單克隆抗體,經(jīng)過(guò)孵育,樣本中存在目的蛋白與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(S-HRP)。洗滌后,加入顯色底物TMB,避光顯色。終止液終止反應(yīng),在450nm波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570-630nm)測(cè)定吸光度值。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中存在目的蛋白濃度成正比。
細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒樣本要求:
1.細(xì)胞培養(yǎng)上清(胞外)
2.體液(血清/血漿、胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等各種積液)
3.分泌物(淚液、唾液、乳汁等)
4.排泄物(尿液、糞便)
5.細(xì)胞裂解物和組織裂解物
細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒細(xì)胞因子主要是指由內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的一類可以參與免疫應(yīng)答的蛋白多肽。對(duì)于細(xì)胞因子的檢測(cè)方法主要有三種:細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)和分子生物學(xué)檢測(cè)。細(xì)胞因子的發(fā)現(xiàn)依賴于其生物學(xué)活性,因此,建立了生物分析法用于細(xì)胞因子的檢測(cè)。隨后,用于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)溶液(如組織培養(yǎng)上清液)中細(xì)胞因子的免疫分析法被建立,并不斷用于實(shí)驗(yàn)室研究。但準(zhǔn)確地、可重復(fù)地測(cè)定細(xì)胞因子具有一定困難,主要原因是細(xì)胞因子的含量極低(大部分都是以pmol/L計(jì)),同時(shí)存在著源于異嗜性抗體,類風(fēng)濕因子以及特異的和非特異的細(xì)胞因子結(jié)合蛋白等的顯著干擾。